布魯菌病感染的鑒定分析！

布魯菌病又稱波狀熱，是布魯菌所引起的動物源 性傳染病。在我國，羊為布魯菌病的主要傳染源，牧 民或獸醫接生羔羊為主要傳播途徑，故該病在我國主 要流行于東北三省、西北部及內蒙古等牧區較為集中的地區。布魯菌病全年均可發病，但有明顯的季節 性，羊種布魯菌病春季開始發病，夏季達高峰，秋季發 病率下降；牛種布魯菌病在夏、秋季發病率較高。 布魯菌病臨床表現多樣，臨床上以長期發熱、多汗、乏 力、關節疼痛、肝脾及淋巴結腫大為特點，多為慢性感 染且并發癥較多。布魯菌病患者多數是以其他疾病 來就診，臨床上容易漏診或誤診。由于布魯菌自身生 長緩慢，鑒定耗時較長，環境要求高等特點，導致鑒定 正確率低，容易錯報或漏報。

１ 臨床資料

患者，男，７５歲，于２０１８年３月牙周膿腫后出現 發熱，伴畏寒，寒戰，最高體溫３８ ℃，無咳嗽、咳痰，無 惡心、嘔吐。因反復發熱１０ｄ，尿痛３ｄ，尿潴留１ｄ入 院。入院查體：神志清晰，精神欠佳，全身皮膚黏膜無 黃染，全身淺表淋巴結未觸及腫大，頭顱無畸形。實 驗室檢查：白細胞計數為８．１×１０９／Ｌ；中性粒細胞百 分比為６７．３％；紅細胞總數、血紅蛋白、血小板等無明 顯異常，紅細胞沉降率（ＥＳＲ）為９ｍｍ／ｈ。

２ 細菌培養、形態觀察及鑒定

血培養第４天需氧瓶報陽，抽血培養物涂片進行 革蘭染色，鏡下見革蘭陰性小桿菌及短小桿菌，呈細 沙樣堆積，轉種血平板，麥康凱平板及嗜血巧克力瓊 脂平板，于５％的 ＣＯ２、３５ ℃條件下培養，次日形成細 小針尖樣菌落。繼續培養１ｄ，革蘭染色后鏡檢見細 小桿菌，氧化酶實驗陽性，觸酶實驗陽性。用生理鹽 水把上 述 菌 落 濃 度 調 成 至 ０．５０～０．６３ 麥 氏 濃 度 （ＭＣＦ），用全自動 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ上機鑒定，６ｈ 后 自 動 鑒 定 結 果 為 吉 拉 爾 玫 瑰 單 胞 菌，可 信 度 為 ９６％，生物編碼１０００００１３００７０１００１。由于對吉拉爾玫 瑰單胞菌了解不足，查閱文獻后，經小組討論并結合患者臨床資料和菌落形態懷疑布魯菌。 通過柯茲羅夫斯基染色（柯氏染色）法，菌落呈紅 色球桿狀，大腸埃希菌 ＡＴＣＣ２５９２２作為對照菌呈綠 色。第２次鑒定，將菌落濃度調成１．０ ＭＣＦ，８．２５ｈ 后 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鑒定為馬耳他布魯菌，可信度為 ９８％。生物編碼 １０００００１３００２０１００１。吉拉爾玫瑰單 胞菌和馬耳他布魯菌兩者生化反應僅琥珀酸鹽產堿 （ＳＵＣＴ）、ＥＬＬＭＡＮ 反應有區別，吉拉爾玫瑰單胞菌 均為陽性，馬耳他布魯菌均為陰性。

３ 血清學試驗

患 者 血 清 進 行 抗 體 檢 測，布 病 虎 紅 平 板 陽 性， 凝集。

４ 討 論 　　

對此，上海博迅認為布魯菌通過吸入，皮膚擦傷，攝取或通過黏膜入侵 宿主細胞，布魯菌最重要的特征是具有在吞噬細胞和非 吞噬細胞內的生存和繁殖的能力。布魯菌不產生經 典的毒力因子，主要毒力因子為脂多糖（ＬＰＳ），Ｔ４ＳＳ 分泌系統和 ＢｖｒＲ／ＢｖｒＳ系統。布魯菌病的治療主 要采用雙藥聯合治療，最常見抗菌藥物的組合為氟喹 諾酮與利福平。目前，有研究使用其他方法破壞布魯 菌 細 胞 內 復 制，例如?；切苋パ跄懰峄蛉藚⒃碥眨?。 本病例中血培養第４天報陽，培養出細小桿菌， 首次調菌落濃度為０．５０～０．６３ ＭＣＦ，因此鑒定為吉 拉爾玫瑰單胞菌。對患者進行調查可知，患者從事羊 養殖業。經過查資料和小組討論，布魯菌為革蘭陰性 球桿菌或短桿菌，單個或成對、短鏈狀排列，無鞭毛及 芽孢；玫瑰單胞菌通常為革蘭陰性、呈鏈狀排列小 球桿菌。兩者形態學特點 相 似，且 生 化 反 應 差 別 較 小，難以鑒別。分析原因，布魯菌菌落濃度配制不正 確，會導致 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鑒定系統鑒定錯誤，布 魯菌菌落濃度應為１．０ＭＣＦ。重新調１．０ＭＣＦ上機 鑒定，第２天鑒定為馬耳他布魯菌。同時進行柯氏染 色，染色后細菌呈紅色球 桿 狀。補 充 了 部 分 生 化 反 應，脲酶試驗陽性。抽取患者血清進行抗體檢測，最 終確定為馬耳他布魯菌。通過這次儀器錯誤的鑒定,意識到對布魯菌屬的鑒定應結合形態染色特征、補充 試驗，了解患者近期接觸史、旅行經歷等臨床資料進 行鑒別。細菌學檢測和血清學檢測是布魯氏病的主 要診斷方法，其中細 菌 學 檢 測 是 診 斷 布 魯 菌 病 的 “金標準”，但耗時較長，環境要求高，檢出陽性率低， 靈敏度不高。