據上海博訊醫療生物儀器股份有限公司了解藤龍補中湯可促進結腸癌細胞的衰老,抑制大腸癌細胞的轉移,降低化療不良反應,促進大腸癌患者胃腸道功能 的恢復。在確保原方療效的同時,通過優化提取工 藝可制備成固體制劑。本研究中上海博訊醫療生物儀器股份有限公司以中醫藥理論為指導原則 ,在不改變提取溶劑的基 礎上 ,以浸膏得率、野黃芩苷、對羥基桂皮酸和多糖含量為考察指標,對藤龍補中方的水提工藝進行優選,為復方顆粒劑的研究提供樣品和技術積累?,F報道如下。
儀器: 1200型高效液相色譜儀( 美國安捷倫公司) ; BS-124S 型電子天平(德國賽多利斯公司) ; 101-2-5型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海躍進醫療器械廠) ; XS105DU型電子天平( 瑞士梅特勒-托利多公司) ; RE-52AA 型旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠) ; HHS型電熱恒溫水浴鍋(上海博訊實業有限公司醫療設備廠) 。
測定野黃芩苷含量時 ,曾分別考察了提取溶劑 、溶劑用量及超聲時間對野黃芩苷提取率的影響。 結果表明,當取樣量為0.25g,提取溶劑為50%甲醇100mL,超聲提取10min,野黃芩苷提取率較高。 測定對羥基桂皮酸含量時,也曾分別考察了提取溶劑、溶劑用量及超聲時間對對羥基桂皮酸提取率的影響。當取樣量為0.2g,提取溶劑為50%甲醇50mL,超聲提取20min,對羥基桂皮酸的提取率較高。
野黃芩苷為半枝蓮的主要成分,在該成分的測定過 程中,先采用與2015年版《中國藥典( 一部) 》半枝蓮藥材項下含量測定方法一致的甲醇-水-醋酸流動相進行測定,由于野黃芩苷色譜峰與相 鄰峰未分開,未達到要求。初步考慮該復方成分較復雜, 可能是某類黃酮類化合物對其造成了影響,需重新調整 流動相?,F行藥典中燈盞細辛含有野黃芩苷,以甲醇-0.1%磷酸溶液為流動相,并根據具體情況 將流動相調整為甲醇-0.1%磷酸溶液, 可獲得較好的色譜峰分離效果。
在建立了3種活性成分含量測定方法的基礎上,以綜合評分法優選該方的水提工藝。選定的3個指標成分中,野黃芩苷和多糖成分的抗腫瘤作用顯著。半枝蓮中的黃酮類化合物在體內外都有顯著的消除自由基的作用,對人結腸癌細胞株 SM480有抑制作用;此外,該復方水提物中含有大量多糖成分,也具有良好的抗腫瘤作用。其中,半枝蓮多糖能抑制HepA小鼠腫瘤生長, 降低H22肝癌小鼠瘤重,提高C26結腸癌小鼠的腫瘤組織凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的活性發揮抗腫瘤作用; 茯苓多糖對胃癌、乳腺癌、肝癌均能起到 一定的抑制作用; 藤梨根中的有效成分獼猴桃根多糖可通過抑制PCNA蛋白的過速增殖而抑制結腸癌和肝癌的增殖;龍葵多糖能顯著抑制小鼠U14細胞的增殖,延長荷瘤小鼠的生存時間,是治療宮頸癌的有效 物質,龍葵中分離得到的糖蛋白類成分能抑制結腸癌細胞HT-29和HCT-116細胞株的增殖,提示該藥中糖蛋白類成分可能是抗結腸癌的藥效物質。