獸醫實驗室高壓滅菌技術探討

高壓蒸汽滅菌技術廣泛應用于各類實驗室，特別是獸醫實驗室，操作微生物較多，高壓滅菌器幾乎成了必備設備。基于高溫水蒸氣具有較強的穿透作用，可以有效的殺滅各種微生物和芽孢，高壓滅菌器可以用于各種微生物的消毒滅菌，不僅可以用于實驗室污染廢棄物的消毒，也可以用于實驗室器械、培養基等清潔物的滅菌。

1 高壓滅菌器規范

根據《中華人民共和國特種設備安全法》等相關法律要求，高壓滅菌器屬于特種設備安全管理范疇，采購前要查驗生產廠家的產品質量證明書，其中應包含產品安全性能監督檢驗書、產品合格證和廠家特種設備制造許可證，安裝時要到當地市場監督管理部門（質量監督部門）進行告知備案，取得特種設備使用登記證后方可使用。高壓滅菌器每 3 年要請有資質的特種設備檢驗單位進行一次檢驗，配件壓力表每半年檢定一次，安全閥每年校驗一次。相關人員持證上崗，使用單位必須有一名人員取得特種設備安全管理證，操作人員必須取得特種設備壓力容器操作證。

2 高壓滅菌器使用

注意安全是第一位的，小心蒸汽燙傷，有的操作者滅菌結束時為了加快排氣，將安全閥提起，這種做法是不允許的，高溫蒸汽容易傷害到人員，另外安全閥一經彈開，彈簧結構發生變化，需要重新校驗。滅菌結束后，打開蓋子時，雖然相對壓力已經降到零，但是水和蒸氣仍然可以達到 100°C左右，操作者應該帶上手套等護具，做好人員防護。要做好用電安全，高壓滅菌器一般電功率較大，多臺滅菌器同時使用要計算好功率，配備適合電纜，不能超載使用，電源必須有效接地，定期測試斷路器，檢查電源線是否被水蒸氣腐蝕等。使用高壓滅菌器要做到污染物、清潔物分開，實驗室不能使用同一個滅菌器進行污物與清潔物的滅菌。必須按照說明書加入合適量的水，應當使用軟化水或蒸餾水防止結垢，滅菌物品容積不超過滅菌器的 3/4，特別注意不能有物品阻擋排氣孔。潔凈物高壓滅菌時，要注意防止濕包現象的產生，濕包即是滅菌后出現了器械等包裝被濕潤的情況，細菌等病原微生物可以通過濕潤的部分污染到潔凈物品上，導致滅菌失敗，引起實驗污染或手術感染。解決濕包的方法是，合理規范的進行包裝，提高蒸汽的質量，減少含水量，使用真空脈動滅菌器。

3 真空高壓滅菌器

有的實驗室使用的是大型脈動雙扉高壓蒸汽滅菌器，扉即是門，雙扉保障了滅菌物品的路徑，是從一側的門進入，從另一側的門取出，達到生物安全效果，脈動是指滅菌器有幾次抽真空的動作，除去冷氣團，達到更好的滅菌效果。抽真空方式不能用于培養等液體的滅菌。生物安全等級較高的實驗室應考慮采用帶有冷凝水收集的高壓滅菌器，此類滅菌器可以對冷凝水進行收集和滅菌，保障生物安全。

4 高壓滅菌消毒效果驗證

國標《實驗室生物安全通用要求》中規定，實驗室要對消毒滅菌效果進行監測，另外消毒效果驗證也是保證實驗結果的重要措施。高壓滅菌器日常使用時，需要放置滅菌指示卡或指示膠帶，滅菌結束后指示卡或膠帶變為指定的顏色，即表示滅菌合格。B- D 測試廣泛用于抽真空滅菌器性能的測試（B 和 D 是兩位發明者的姓氏字母），有商品化的檢測包，將B- D 測試包單獨放置于滅菌器的中央，使用 134°C，3.5min抽真空條件滅菌（具體參照說明書），滅菌后指示卡呈現規定交叉圖案，說明真空滅菌效果合格。另外可以使用微生物培養的方法進行滅菌器效果驗證，將菌片（枯草芽孢桿菌等）用多層紗布包裹，滅菌后將菌片投入特定培養基后觀察，培養基指示劑變色說明仍然有細菌生長，滅菌失敗，培養基澄清
未變色，說明沒有細菌生長，滅菌效果合格。